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ECL增強型發光液

規格

BE6705-100            50ml+50ml

BE6705-500            250ml+250ml

簡介

本試劑盒優化了底物組成，使用了新型高效增強劑，發光強度比傳統ECL顯色液提高了30-50 倍，并有效地降低了背景。試劑盒使用新的氧化劑代替不穩定的雙氧水，提高了試劑盒的穩定性，室溫可穩定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后，發出特定波長熒光（400-450 nm），可對 X 光膠片曝光，也可直接使用熒光 CCD 掃描，主要應用于Western檢測以及化學發光免疫檢測系統。

緩沖液用量

一抗工作濃度：0.2-1.0 μg/mL；

HRP標記二抗工作濃度：10-500 ng/mL，根據二抗效價調整；

顯色液的使用比例：Solution I : Solution II = 1:1；10 cm2 轉印膜使用1-2 mL工作液。

操作步驟

根據常規操作轉印結束后，進行封閉、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步驟，根據膜的大小，按每 10cm2 膜使用 1-2mL 工作液，按比例吸取等體積溶液 I 和溶液 II 混勻，配制成發光檢測工作液。用 平頭鑷子將膜取出，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，去除膜上多余的液體。用移液器將工作液加到轉印膜上，使其均勻覆蓋，室溫孵育 1-2 分鐘，此步驟可在潔凈保鮮膜上或塑料盒中完成。

X光膠片法

1) 用平頭鑷子夾起轉印膜，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，去除膜上多余的液體，留下少量工作液，不要讓膜完全干燥。膜的蛋白面朝上，包裹于潔凈保鮮膜內。輕輕趕出其間的氣泡，用小塊透明膠帶粘住四角，固定在X光片暗盒內。

2) 在暗室中取一張X 光膠片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分鐘。立即定影、顯影，根據曝光強度，調整下一張 X 光膠片的曝光時間。如果背景過高，可以使用兩張 X
光膠片同時壓片。

熒光拍照法

1) 如果需要使用CCD拍照，可以將膜放置于工作液中，開機后按照使用說明，將轉印膜取出，進行拍照。

2） 可以根據背景情況，調整機器測量參數，提高信噪比。

管式化學發光法

1) 將魯米諾的化學發光檢測波長可設定在 425nm 左右，可以選擇單點測量，或者取多次平均值。

2) 按照機器要求，將配制好的工作液加入到樣品管中，間隔一定時間測量發光強度。